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          小麥耐熱性的分子生物學基礎
          發布時間:2019-08-09

            摘要:小麥是中國第二大口糧作物, 其產量直接關系人民的生活水平, 所以高產和穩產一直是中國小麥的首要育種目標。小麥起源于溫帶, 屬喜涼作物, 生長季節內的高溫對生長發育會產生不利影響, 使其產量下降, 品質變劣。由于耐熱性是復雜的數量遺傳性狀, 其機制的解析一直是生物學研究難點, 也是研究熱點。為了解析小麥耐熱的生理遺傳學及分子生物學基礎, 國內外研究人員通過正向遺傳學方法, 構建遺傳分離群體, 以冠層溫度、灌漿持續時間、細胞膜穩定性和葉綠素含量等生理學參數, 以及穗粒數和千粒重熱感指數為指標, 在小麥不同染色體上定位了多個耐熱相關的QTL位點。同時利用反向遺傳學方法, 特別是通過轉錄組、蛋白組和表觀遺傳組等組學方法鑒定了大量的高溫脅迫響應的基因、mi RNA及長片段非編碼RNA, 并通過轉基因等手段證明了部分候選基因在小麥抵御高溫脅迫中的重要作用。另外, 雖然植物中高溫受體至今尚未發現, 但是鈣離子信號通道以及ABA和SA等激素在高溫信號傳導中的作用也逐漸引起人們的關注。文中主要綜述了現階段高溫對小麥產量品質及生理性狀的影響、小麥耐熱相關QTL的定位, 以及小麥響應高溫脅迫的轉錄組、蛋白組和表觀遺傳組的研究進展;提出應針對小麥種質資源進行系統的耐熱性評價, 篩選優異等位基因、解析其分子遺傳機理, 通過創新再利用, 為選育適合中國氣候條件的耐熱小麥品種提供新材料, 實現品種耐熱性與豐產性的統一。

            關鍵詞:普通小麥; 耐熱性; 分子機理;

            作者簡介: 辛明明;E-mail:mingmingxin@cau.edu.cn.

          Progresses in Research of Physiological and Genetic Mechanisms of Wheat Heat Tolerance

            Abstract:Wheat (Triticum aestivum) is a second largest staple crop in China, which closely related to the improvement of people's living standards, and high and stable yield is the most important target in wheat breeding program. Nowadays, heat stress has become one of the limiting factors for wheat production, because wheat is a chimonophilous crop, and very sensitive to heat stress especially at productive stage, which would cause decrease in both wheat quantity and quality. Recently, to analyze the physiological, genetic and molecular basis of heat tolerance in wheat, researchers have developed diverse segregation populations with different heat sensitivities, and mapped dozens of heat-tolerant QTLs on wheat chromosomes in terms of canopy temperature, grain filling duration, membrane stability and chlorophyll content, as well as heat sensitivity index of grain number and thousand kernel weight. In addition, transcriptome, proteome, and epigenome analyses have been applied to identify heat responsive genes, mi RNAs and long non-coding RNAs, and some of which have been proved to contribute to the heat tolerance in wheat. Although receptors of heat signal is not yet identified, calcium ion channel and phytohormone e.g. ABA and SA exhibited a crucial role in signal transduction. In this paper, the progresses in research of heat-tolerance related QTL mapping, transcriptome, proteome and epigenome profiling and heat-responsive gene identification were summarized, and proposed that it is necessary to perform systematical evaluation of wheat germplasm, screening of allelic variation and analysis of underlying molecular mechanism for further utilization in wheat breeding program to develop wheat cultivars with high and stable yield in China.

            Keyword:common wheat; heat tolerance; molecular mechanism;

            隨著溫室效應加劇, 全球平均氣溫不斷升高, 高溫天氣頻發。據報道, 從1880年到2012年全球的平均地表溫度增加約0.85℃, 在可預見的未來氣溫還將繼續升高 (IPCC, 2014) .小麥屬于溫帶起源的喜涼作物, 高溫能夠引起小麥葉片萎蔫、生長勢減弱、育性降低并影響籽粒灌漿, 使其產量下降, 品質變劣。據預測, 未來平均氣溫每升高1℃, 全球小麥產量將減產約6%[1].在中國, 小麥籽粒灌漿期經常遭遇30℃以上的高溫天氣, 特別是黃淮海和新疆等小麥主產區易形成干熱風, 其危害面積可達該區域小麥種植面積的2/3, 使小麥減產10%-20%[2].高溫已經成為制約中國甚至世界小麥糧食生產的重大氣候災害之一, 因此, 鑒定小麥耐熱材料, 發掘優異等位變異并解析其耐熱的遺傳和分子調控機理, 對培育小麥耐熱品種具有重要的理論和實際應用意義。

            高溫對小麥不同發育時期性狀影響不同:出苗至分蘗期, 高溫主要減少其分蘗數目;拔節至開花期, 高溫則導致單株穗數、穗粒數和千粒重等性狀減少;開花后至成熟期, 高溫主要縮短灌漿期而使粒重降低并影響籽粒的品質性狀[3].FISCHER等[4]報道在拔節至開花期間, 高溫處理小麥, 平均溫度每升高1℃, 籽粒產量下降3%-4%.WARDLAW等[5]報道灌漿期間, 在15.8-27.7℃范圍內, 溫度每升高1℃, 能使灌漿時間縮短約3.l d, 千粒重下降2.8 g.SOFIELD等[6]認為灌漿過程期間, 如果溫度超過30℃, 淀粉和蛋白質的積累都受顯著負面影響, 但是淀粉的合成對高溫更加敏感, 使蛋白質相對含量提高, 并且熱敏感品種蛋白質含量增加的幅度 (0.22%/天·40℃) 顯著高于耐熱品種 (0.13%/天·40℃) .進一步研究發現, 高溫脅迫沒有影響灌漿期間小麥淀粉合成底物 (蔗糖) 的供應, 灌漿速度減慢主要是由于抑制了淀粉合成相關酶的活性, 降低了向淀粉的轉化率, 例如可溶性淀粉合成酶 (SSS) 、ADP-葡萄糖焦磷酸化酶 (AGPase) 、顆粒結合淀粉合成酶 (GBSS) 和淀粉分支酶 (SBE) [7,8,9].

            高溫脅迫也嚴重影響了小麥生長發育的生理生化特征, 例如能夠導致PSⅡ系統電子傳遞效率下降, 熱耗散不斷增加, 進一步加劇PSⅡ系統的損害[10,11,12,13].此外, 高溫脅迫還會使植物體內的酶代謝失活, 降低葉綠素的合成效率, 引發氧化脅迫, 加速葉綠素降解, 從而導致植物葉綠素含量的減少, 直接影響植物的光合作用[14].研究顯示, 小麥在營養生長和生殖生長階段高溫處理7 d (32℃/27℃, 晝/夜) , 使其光合作用效率分別降低32%和11%, 生物產量分別降低32%和15%[15].蘇德蔭等[16]研究發現, 在一定溫度范圍內 (25℃-35℃) , 小麥的呼吸作用隨著溫度的增加而增加, 但是光合效率卻急劇下降, 34℃時凈光合強度和呼吸強度幾乎相等, 導致植物體內無光合產物的積累。WARDLAW等[5]進一步研究表明, 當溫度從21℃/16℃ (晝/夜) 升高到30℃/25℃ (晝/夜) 時, 由于呼吸作用的加強造成小麥25%產量損失。同時, 高溫對小麥的蒸騰速率也有重要的影響, 但不同品種對高溫的反應不一致, 例如熱敏感品種藁城8901、豫麥49和周麥18高溫處理后, 蒸騰速率與對照相比明顯下降 (47.3%、40.5%和53.4%) , 而耐熱品種鄭麥9405的蒸騰速率較對照略有上升[17].高溫還會影響小麥的其他生理生化指標, 例如郭洪雪等[18]對二葉期小麥葉片進行1、12、24和36 h高溫處理, 發現超氧化物歧化酶 (SOD) 活性及膜脂過氧化產物 (MDA) 含量呈現先上升后下降變化趨勢, 而可溶性糖含量一直呈現上升趨勢。

          小麥

            1、小麥耐熱性的遺傳學基礎

            利用遺傳改良培育耐熱性小麥品種是抵御高溫脅迫的有效措施。SUN等[19]首次利用膜熱穩定測定法對硬粒小麥 (Langdon) 的耐熱相關基因進行了染色體定位研究, 發現其與染色體3A、3B、4A、4B和5A有關。徐如強等[20]對普通小麥品HOPE和中國春 (CS) 的研究則表明, 耐熱相關基因主要存在于第2和3部分同源群的染色體上。陳希勇等[21]以CS和HOPE染色體代換系為材料, 發現在HOPE的2A、3A、2B、3B和4B染色體上均具有耐熱相關基因位點。另外, 孫其信等[22]發現異源細胞質對耐熱性有顯著影響, 并存在顯著的核質互作。

            隨著分子標記技術的快速發展, 利用生理學指標和熱感指數, 研究人員在小麥不同染色體上鑒定出多個耐熱相關QTL位點。例如, 以冠層溫度為指標, PINTO等[23]利用Seri/Babax的167個重組近交系定位了16個與高溫密切相關的QTL, 能夠解釋28%的表型變異, 發現位于4A和3B的QTL對高溫和干旱同時有貢獻;BENNETT等[24]利用RAC875/Kukri DH群體在3B染色體上發現了2個耐熱相關QTL, 能夠解釋高溫條件下表型變異的22%;PALIWAL等[25]利用耐熱品種NW1014和熱敏感品種HUW468構建了148個重組自交系, 定位了7BL的耐熱相關QTL, 其解釋約20%的表型變異。以葉綠素含量和葉綠素熒光參數為指標, VIJAYALAKSHMI等[26]利用冬小麥耐熱品種Ventnor和熱敏感品種Karl92構建了重組近交系, 在2A、3A、3B、6A、6B和7A染色體上分別鑒定到9、1、1、2、2和1個耐熱相關QTL;利用Ventnor和Karl92的F2:3家系, YANG等[27]以灌漿持續時間為參數, 檢測到與之緊密連鎖的2個QTL, 分別能夠解釋表型變異的11%和12%.另外, TALUKDER等[28]利用GBS-SNP標記構建了重組近交系小麥遺傳圖譜, 測量TMD (thylakoid membrane damage) 、SCC (SPAD chlorophyll content) 、PMD (plasma membrane damage) 等生理指標, 在基因組上共鑒定到5個QTL區域與高溫抗性緊密相關, 分別位于1B、1D、2B、6A和7A染色體上, 其中TMD相關位點 (6A、7A和1D) 能夠解釋耐熱性變異的11.9%-30.6%, SCC相關位點 (6A、7A、1B和1D) 能夠解釋耐熱性變異的11.4%-30.8%, PMD相關位點 (7A、2B和1D) 能夠解釋耐熱性變異的10.5%-33.5%.

            以穗粒數及粒重熱敏感指數為指標, MASON等[29]利用121個小麥重組近交系 (Halberd×Karl92) 在1B、5A和6D染色體上鑒定了14個QTL, 能夠解釋表型變異的4.5%-19.3%;以Halberd和Cutter重組近交系為材料, MASON等[30]考察了產量、旗葉長度、旗葉寬度和蠟質含量的熱敏感指數, 在1A、2A、2B和3B染色體上定位了5個QTL位點, 解釋了9.8%-38.6%效應;以千粒重、灌漿時間和產量熱敏感指數為指標, PALIWAL等[25]利用148個NW1014和HUW468的重組自交系在2B、7B和7D染色體上鑒定到4個與耐熱相關的QTL區間, 能夠解釋表型變異的7.21%-25.39%.李世平等[31]利用旱選10號和魯麥14的DH群體對小麥幼苗耐熱性QTL進行了分析, 考察了高溫脅迫前后苗的根干重、苗干重、幼苗生物量、葉片葉綠素含量、葉綠素熒光參數及其耐熱指數等性狀, 發現控制幼苗耐熱相關性狀的QTL位點在2D、6B、3A、4A、5A和7A染色體上分布較多, 而控制幼苗性狀耐熱指數的QTL在染色體6A、6B、3A、2D、5A和7A上分布較多, QTL位點在染色體上的分布有區域化的趨勢。另外, 利用相同材料, 李世平等[32]對其灌漿期生理性狀及千粒重耐熱指數也進行了QTL定位分析, 共檢測到與耐熱性相關的12個加性效應QTL和17對上位性效應QTL, 分布在除1D、6D和7B以外的所有染色體上, 其中染色體1B、2D、5A、5B、6A、6B和7A與灌漿期耐熱性關系密切, 這12個加性效應QTL對表型變異的平均貢獻率為6.47%, 17對上位性效應QTL的平均貢獻率為4.66%.

            小麥耐熱性屬多基因控制的數量性狀, 性狀考察難度較大, 其遺傳學基礎的研究相對滯后。近年來, 研究人員利用耐熱性具有差異的材料構建遺傳分離群體, 以冠層溫度、灌漿持續時間、細胞膜穩定性和葉綠素含量等生理學參數, 以及穗粒數和千粒重熱感指數為指標, 定位了多個與耐熱性密切相關的QTL, 分布在小麥不同染色體上。值得注意的是, 多個遺傳群體在第3部分同源群都定位到了耐熱相關的QTL, 說明其對小麥耐熱性貢獻比較穩定。這些研究為以后耐熱相關QTL的聚合, 指導小麥分子標記輔助育種奠定了堅實的基礎。但是, 可以清楚地看到, 小麥耐熱QTL的研究仍處在初步定位階段, 遠未達到精細定位階段, 離候選基因克隆尚有一定的距離。鑒定穩定的耐熱相關QTL, 建立精細定位群體, 利用新的分子標記技術對目標基因進行精細定位并克隆將會是未來小麥耐熱性遺傳研究的一個重要方向。

            2、小麥耐熱性的分子生物學基礎

            2.1 小麥高溫信號感知與傳導

            植物固著生長, 遇到高溫脅迫時不能迅速移動躲避, 因此為了適應環境變化而進化出了多種分子機制來調節自身的生長發育。植物細胞對高溫刺激的感受和傳遞是引起保護性響應并產生耐熱性的關鍵步驟, 雖然目前沒有關于植物感受高溫的傳感器系統的報道, 細胞膜流動性和鈣離子信號途徑與感受和傳遞高溫信號密切相關。王飛等[33]以小麥耐熱基因型TAM107和熱敏感基因型CS為材料, 發現高溫脅迫后, TAM107的細胞膜穩定性顯著高于CS, 同時, 作為耐熱指示性脂肪酸的C18:3含量在TAM107的下降比例 (39.84%) 顯著高于CS (28.28%) , 說明耐熱小麥品種的膜系統較熱敏感品種對高溫逆境有較強的耐受性。另外, 李利紅等[34]在小麥灌漿期間葉面噴施Ca Cl2可保護D1蛋白, 提高光系統Ⅰ和Ⅱ的電子傳遞速率和全鏈電子傳遞速率, 同時提高凈光合速率和最大光化學效率, 使小麥適應高溫等環境。

            脫落酸 (ABA) 是植物響應非生物脅迫最重要的一種植物激素, 在遭受高溫時, 植物體內都會迅速積累大量的ABA, 啟動下游耐熱相關基因如熱激蛋白, 從而使植物抗逆性增強[35].CAMPBELL等[36]在小麥幼苗克隆到2個熱激蛋白基因 (Ta HSP101B和Ta HSP101C) , 它們的表達受到高溫和ABA刺激的誘導表達。楊東清等[37]發現高溫環境下外源噴施ABA能夠降低GA3含量, 提高小麥灌漿速率, 提高了籽粒胚乳細胞增殖速率, 擴大胚乳細胞數目, 最終提高小麥的耐熱性。另外, SEARS等[38]報道通過篩選對ABA不敏感的突變體能夠提高小麥耐高溫的能力, 進一步說明了ABA對小麥耐熱性的貢獻。水楊酸 (salicylic acid, SA) 也廣泛參與了植物對高溫脅迫的響應[39].當植物體遭受外界脅迫刺激時, 活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 水平會升高, 其過量積累就會引起細胞的氧化脅迫。水楊酸主要通過激活抗氧化脅迫相關基因, 清除活性氧分子來提高植物的耐熱性[40,41].在小麥葉片上外源施加SA可以誘導抗氧化酶APX和SOD的活性, 提高高溫脅迫下對活性氧的清除能力, 同時能夠增加體內游離脯氨酸的積累, 改善滲透調節能力, 最終提高小麥的耐熱性[42].

            2.2 小麥高溫脅迫響應的轉錄組分析

            植物應對高溫脅迫的響應過程中, 大量基因都會發生差異表達。利用高通量的組學方法可以從總體上揭示基因表達對高溫脅迫的響應規律。QIN等[43]利用小麥基因芯片對TAM107和CS在高溫脅迫下的轉錄表達譜進行了分析, 鑒定到6 560個高溫脅迫響應的探針, 其中, 劇烈響應探針主要編碼熱激蛋白和熱激轉錄因子、鐵蛋白、GA調節蛋白等, 并發現光合作用相關基因在CS中下調更劇烈, 暗示熱敏感品種CS在高溫脅迫下光合作用受到了嚴重抑制, 而部分編碼泛素蛋白、核糖體蛋白、泛素激活酶的基因在TAM107中被特異上調表達, 這些差異可能是造成這兩個品種耐熱性差異的原因之一。

            SZUCS等[44]利用寡核苷酸基因芯片研究了小麥品種Plainsman V和Cappelle Desprez在干旱脅迫和旱熱共脅迫的籽粒轉錄組響應, 分析顯示干旱脅迫只造成大約0.5%的基因發生差異表達, 而旱熱共脅迫下差異表達基因的數目增加到5%-7%, 且貯藏蛋白基因、淀粉代謝相關基因以及胚和胚乳發育有關基因只在旱熱共脅迫下表現出顯著差異表達。

            LIU等[45]利用高通量測序對TAM107和CS進行了高溫、干旱和旱熱共脅迫下的苗期葉片轉錄組測序, 雖然3種脅迫下差異表達基因都顯著富集在逆境脅迫相關代謝途徑 (如“response to water deprivation”、“heat acclimation”、“response to wounding”) , 但仍然有1 738 (16%) 和2 482 (23%) 個基因特異受旱熱共脅迫誘導上調和下調表達。另外, 作者發現部分耐熱相關基因在染色體上成簇分布, 而且成簇分布的基因編碼功能類似的蛋白, 但是這些基因的時空表達模式存在差異, 這可能是小麥在長期進化過程中通過基因復制形成的。進一步分析發現, 小麥苗期葉片中有49%的基因其A、B、D部分同源基因在脅迫條件下表達模式發生了顯著分化, 而且脅迫越劇烈, A、B、D部分同源基因表達分化程度也越高, 這種部分同源基因差異表達可能有利于小麥更好地適應高溫脅迫。

            2.3 小麥高溫脅迫響應的蛋白質組分析

            蛋白質組學是以基因組學和高通量蛋白質分析技術為基礎發展起來的一門新興學科, 可以大規模分析差異表達的蛋白質組分。SKYLAS等[46]以耐熱品種Fang和熱敏感品種Wyuna為材料, 利用雙向凝膠電泳進行高溫脅迫前后的小麥胚乳蛋白質組進行分析, 結合質譜鑒定了48個處理前后差異表達的蛋白點, 其大多數是小分子熱激蛋白, 并且有7個蛋白點只在耐熱品種中表達。MAJOUL等[47]利用雙向凝膠電泳結合質譜分析研究了高溫對小麥籽粒醇溶蛋白表達的影響, 鑒定到37個受高溫脅迫后差異表達的蛋白點, 進一步分析發現25個蛋白受高溫誘導上調表達包括6個熱激蛋白, 另外只有1個葡萄糖-6-磷酸腺苷酰轉移酶下調表達。同時, 作者對高溫脅迫下非醇溶蛋白的變化進行了分析, 發現43個高溫脅迫響應蛋白, 其中24個上調表達, 19個下調表達。這些差異表達的蛋白涉及到淀粉合成, 碳水化合物代謝, ATP合成以及翻譯起始的因子[48].KAMAL等[49]利用China-108、Yeonnon-78、Norin-61和Kantou-107 4個小麥品種鑒定到124個逆境脅迫響應蛋白, 其中39個 (31.56%) 蛋白受高溫誘導表達, 包括熱激蛋白、熱激轉錄因子、GTP結合蛋白、β淀粉酵素、顆粒結合淀粉合成酶、延伸因子等。LAINO等[50]為了研究高溫對硬粒小麥蛋白質的影響, 以Svevo為材料, 利用雙向凝膠電泳結合質譜分析對其灌漿期間的非醇溶蛋白進行了分析, 發現132個多肽在高溫脅迫前后差異表達, 其中47個通過質譜得到了進一步驗證, 包括熱激蛋白、糖酵解和碳水化合物代謝相關蛋白以及脅迫相關蛋白等。WANG等[51]利用耐熱品種810和熱敏感品種1039進行高溫脅迫前后葉片蛋白質組學分析, 發現高溫脅迫后, 光合作用相關蛋白、糖酵解相關蛋白、熱激蛋白和ATP產生相關蛋白在2個小麥品種中都存在差異表達。與熱敏感品種相比, 耐熱品種中信號轉導、熱激蛋白、光合作用和抗氧化相關蛋白上調表達, 氮素轉運相關蛋白下調表達。

            2.4 小麥高溫脅迫響應的表觀遺傳組學分析

            表觀遺傳學是近年來的研究熱點, 指在DNA序列沒有發生變異的情況下, 基因表達發生可遺傳的改變, 主要通過DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質重塑和小分子RNAs調控等來實現, 它在調節植物生長發育和響應逆境脅迫等方面發揮了重要作用。GARDINER等[52]利用亞硫酸鹽測序方法從全基因組水平上鑒定了小麥的DNA甲基化水平, 發現溫度升高能夠影響40個位點的修飾水平發生改變, 并且發現20個基因的表達水平和DNA甲基化水平同時發生改變, 暗示著高溫引起的基因表達變化可能與DNA甲基化密切相關。利用抑制DNA甲基化試劑5-azacytidine處理耐熱材料TAM107、冀麥5265和熱敏感材料CS, 劉建[53]通過觀察萎蔫程度和測定細胞膜穩定性發現, 降低DNA甲基化后能顯著提高小麥耐熱性。同時利用RNA-seq對5-azacytidine試劑處理并高溫脅迫的TAM107苗期葉片進行了轉錄組測序, 結合已發表的分析的高溫脅迫轉錄組數據和小麥甲基化數據[45,52], 發現DNA甲基化抑制劑從全基因組水平上改變了高溫響應的基因數目、種類及功能類別, 而且差異表達的基因中約37%的基因可能存在DNA甲基化位點。進一步分析發現, 高溫脅迫響應的小麥部分同源基因 (51%) 的表達分化模式也受到5-氮雜胞苷處理的影響, 證明DNA甲基化在抵御高溫過程中發揮著重要作用[53].

            非編碼RNA是指不能編碼蛋白質的RNA, 包括長片段非編碼RNA和小分子RNA.XIN等[54]開展了高溫脅迫響應的小麥長片段非編碼RNA的相關工作, 利用耐熱小麥品種TAM107在全基因組水平上鑒定出125個長片段非編碼RNA, 其中77個在高溫脅迫前后差異表達, 并且乙酰化修飾水平的改變與部分高溫響應的長片段非編碼RNA的差異表達密切有關。另外, 通過生物信息學分析發現部分長片段非編碼RNA是通過產生小分子RNA行使功能。因此, 作者又利用Solexa高通量測序技術對高溫脅迫前后的小RNA表達譜進行了分析, 篩選出32個高溫脅迫前后差異表達的mi RNA, 發現同一家族的不同mi RNA成員表達在高溫脅迫前后也存在分化[55].WANG等[56]發現mi R159在高溫脅迫以后顯著下調表達, 并且其調控的靶基因Ta GAMYB上調表達, 在水稻中超表達小麥Tami R159顯著降低了其耐熱性, 暗示mi R159-Ta GAMYB途徑在響應小麥高溫脅迫過程中發揮著重要的作用。另外, 組蛋白乙酰化修飾水平也可能與小麥耐熱性密切相關。HU等[57]報道了擬南芥At GCN5突變以后耐熱性明顯降低, 而其小麥同源基因能夠恢復擬南芥突變體的耐熱性。Ch IP分析結果表明GCN5能夠顯著富集在HSFA3和UVH6的啟動子區域, 有利于H3K9和H3K14的乙酰化, 從而提高響應基因的表達水平。

            隨著組學技術的發展, 人們發現高溫脅迫通過轉錄水平、翻譯水平和代謝水平廣泛地影響了植物的生長發育。相應地, 植物中大量高溫脅迫響應基因被鑒定出來, 通過功能富集分析發現, 這些基因除了富集在逆境響應途徑, 激素和表觀遺傳修飾途徑也參與了植物抵御高溫脅迫的過程。XIN等[54,55]關于mi RNA和長片段非編碼RNA的研究, 劉建[53]關于DNA甲基化的研究以及HU等[57]對組蛋白修飾的研究進一步證明了這一推斷。然而在很長一段時間, 由于小麥轉基因技術的不完善, 候選基因的功能驗證成為解析小麥耐熱分子機理的瓶頸, 許多研究人員只好利用擬南芥等模式植物進行功能驗證, 但是雙子葉植物擬南芥和單子葉植物小麥具有很大的差異, 而且參與小麥耐熱響應的許多基因在擬南芥中不存在同源基因, 因此, 在研究中具有很大的局限性, 這也是導致小麥耐熱分子機理研究滯后的重要原因之一。

            3、結論與展望

            高溫脅迫已經成為限制小麥生產的重大氣候災害之一, 其耐熱性的遺傳改良成為生產中急需解決的重大科學問題, 因此, 搜集、評鑒并再利用小麥耐熱遺傳材料, 研究小麥耐熱的生理學、遺傳學和分子生物學基礎, 實現品種耐熱性與高產的統一, 已成為小麥研究中的熱點和難點。

            中國是小麥資源大國, 擁有種質資源4.3萬份, 但是對耐熱種質資源沒有系統評價以及耐熱優異等位基因的發掘。以前小麥資源的收集、引進、篩選和創新再利用的研究主要以高產抗病為主, 對高溫脅迫影響缺乏深刻的認識, 研究的深度、廣度不夠, 限制了育種中抗逆親本有針對性地選擇利用, 難以滿足小麥生產發展的需要;另外, 沒有建立簡單易行的穩定評價指標, 尚未形成標準的小麥耐熱性評價體系, 加大了小麥耐熱研究的困難;同時耐熱相關基因的分子標記開發不夠, 難以通過基因聚合為輔助育種改良小麥耐熱性提供有效的幫助, 所以未來急需建立標準的小麥耐熱性評價標準, 開展中國耐熱小麥品種資源評價及耐熱相關基因分子標記的開發和應用。

            在基礎研究方面, 目前, 在水稻和擬南芥中相繼圖位克隆了耐熱基因, 但是鑒于小麥基因組的龐大和復雜, 雖然研究人員通過構建遺傳連鎖群體, 以不同農藝性狀和生理性狀為指標, 定位了多個耐熱相關的QTL并開發了與之緊密連鎖的分子標記, 但迄今為止尚未見小麥耐熱QTL的克隆報道, 使得小麥耐熱性的遺傳學基礎研究與其他植物相比相對落后。同時, 由于轉基因等生物技術在小麥研究中應用的滯后, 基因在小麥抵御高溫脅迫中的功能驗證也一直停滯不前, 小麥耐熱的分子生物學基礎研究也相對薄弱。但是近幾年, 隨著小麥基因組信息的逐漸完善和分子標記技術的飛速發展, 例如小麥660K、90K芯片的開發和利用以及BSA-RNA-seq的應用使得耐熱相關QTL的定位會更加精確, 為基因的克隆提供了技術支持。另外, 日本煙草公司農桿菌介導的小麥轉基因技術的引進和中國基因槍技術轉化小麥效率的提高打破了這種限制, 同時CRISPR-Cas9技術的發展為小麥基礎研究提供了技術支持, 以上的技術和信息儲備令小麥耐熱功能基因組研究和結構基因組研究迎來了一個巨大的機遇和挑戰。如果能夠加強小麥耐熱材料的評價、優異等位基因的篩選、耐熱遺傳學和分子生物學研究領域的投入, 不僅能夠使中國在相關的基礎研究取得世界領先地位, 同時可以為中國小麥耐熱性的遺傳改良提供數據基礎和技術支持, 對保障中國小麥高產穩產具有重要理論和實踐意義。

            參考文獻

            [1]LIPIEC J, DOUSSAN C, NOSALEWICZ A, KONDRACKA K.Effect of drought and heat stresses on plant growth and yield:A review.International Agrophysics, 2013, 27 (4) :463-477.
            [2]金善寶。中國小麥品種及其系譜。北京:農業出版社, 1983.JIN S B.Wheat Cultivar and Pedigree in China.Beijing:Agriculture Press, 1983. (in Chinese)
            [3]徐如強, 孫其信, 張樹榛。小麥耐熱性研究現狀與展望。中國農業大學學報, 1998, 3 (3) :33-40.XU R Q, SUN Q X, ZHANG S Z.Current status and perspective on the investigation of heat tolerance in wheat.Journal of China Agricultural University, 1998, 3 (3) :33-40. (in Chinese)
            [4]FISCHER R A, MAURER O R.Crop temperature modification and yield potential in a dwarf spring wheat.Crop Science, 1976, 16:855-859.
            [5]WARDLAW I F, SOFIELD I, CARTWRIGHT P M.Factors limiting the rate of dry matter accumulation in the grain of wheat grown at high temperature.Functional Plant Biology, 1980, 7 (4) :387-400.
            [6]SOFIELD I, EVANS L T, COOK M G, WARDLAW I F.Factors influencing the rate and duration of grain filling in wheat.Australian Journal of Plant Physiology, 1977, 4 (5) :785-797.
            [7]BHULLAR S S, JENNER C F.Effects of temperature on the conversion of sucrose to starch in the develop ing wheat endosperm.Australian Journal of Plant Physiology, 1986, 13:605-615.
            [8]KEELING P L, BACON P J, HOLT D C.Elevated temperature reduced starch deposition in wheat endosperm by reducing the activity of soluble starch synthase.Planta, 1993, 191:342-348.
            [9]HURKMAN W J, MCCUE K F, ALTENBACH S B, KORN A, TANAKA C K, KOTHARI K M, JOHNSON E L, BECHTEL D B, WILSON J D, ANDERSON O D, DUPONT F M.Effect of temperature on expression of genes encoding enzymes for starch biosyntheses in developing wheat endosperm.Plant Science, 2003, 164 (5) :1-9.
            [10]張哲, 閔紅梅, 夏關均, 賈國梅。高溫脅迫對植物生理影響研究進展。安徽農業科學, 2010, 38 (16) :8338-8339.ZHANG Z, MIN H M, XIA G J, JIA G M.Research advances on influence of high temperature stress on some physiological characteristics of plants.Journal of Anhui Agricultural Science, 2010, 38 (16) :8338-8339. (in Chinese)
            [11]云建英, 楊甲定, 趙哈林。干旱和高溫對植物光合作用的影響機制研究進展。西北植物學報, 2006, 26 (3) :0641-0648.YUN J Y, YANG J D, ZHAO H L.Research progress in the mechanism for drought and high temperature to affect plant photosynthesis.Acta Botanica Boreali-Occidentlia Sinica, 2006, 26 (3) :0641-0648. (in Chinese)
            [12]陳鋒, 田紀春, 孟慶偉, 趙世杰。短期高溫脅迫對高產小麥品系灌漿后期旗葉光系統Ⅱ功能的影響。應用生態學報, 2006, 17 (10) :1854-1858.CHEN F, TIAN J C, MENG Q W, ZHAO S J.Effects of short-term high temperature stress on flag leaf photosystemⅡfunctions of high-yielding wheat at late grain-filling stage.Chinese Journal of Applied Ecology, 2006, 17 (10) :1854-1858. (in Chinese)
            [13]YOSHIOKA M, UCHIDA S, MORI H, KOMAYAMA K, OHIRA S, MORITA N, NAKANISHI T, YAMAMOTO Y.Quality control of photosystem II-Cleavage of reaction center D1 protein in spinach thylakoids by Fts H protease under moderate heat stress.The Journal of Biological Chemistry, 2006, 281 (31) :21660-21669.
            [14]TEWARI K A, TRIPATHY C B.Temperature-stress-induced impairment of chlorophyll biosynthetic reactions in cucumber and wheat.Plant Physiology, 1998, 117 (3) :851-858.
            [15]AL-KHATIB K, PAULSEN G M.Photosynthesis and productivity during high-temperature stress of wheat genotypes from major world regions.Crop Science, 1990, 30 (5) :1127-1132.
            [16]蘇德蔭, 房戈英, 鄭愛寧。高溫對夏播小麥幼苗的生理障礙。山西農業科學, 1983 (5) :8-9.SU D Y, FANG Y Y, ZHENG A N.The effects of high temperature on summer sowed wheat seedlings.Shanxi Agricultural Science, 1983 (5) :8-9. (in Chinese)
            [17]齊學禮, 胡琳, 董海濱, 張磊, 王根松, 高崇, 許為鋼。強光高溫同時作用下不同小麥品種的光合特性。作物學報, 2008, 34 (12) :2196-2201.QI X L, HU L, DONG H B, ZHANG L, WANG G S, GAO C, XU W G.Characteristics of photosynthesis in different wheat cultivars under high light intensity and high temperature stresses.Acta Agronomica Sinica, 2008, 34 (12) :2196-2201. (in Chinese)
            [18]郭洪雪, 宋希云, 燕增文, 裴玉賀, 王海娟, 劉蘭浩。高溫脅迫對小麥幼苗幾個生理生化指標的影響。華北農學報, 2007, 22:71-74.GUO H X, SONG X Y, YAN Z W, PEI Y H, WANG H J, LIU L H.Effects of heat stress on several physiological and biochemical indexes of wheat.Acta Agricuturae Boreali-Sinica, 2007, 22:71-74. (in Chinese)
            [19]SUN Q X, QUIEK J.Chromosomal location of genes for heat tolerance in tetraploid wheat.Cereal Research Communications, 1991, 19 (4) :431-437.
            [20]徐如強, 孫其信, 張樹榛。普通小麥品種Hope細胞膜熱穩定性基因的染色體定位。遺傳, 1996 (4) :1-3.XU R Q, SUN Q X, ZHANG S Z.Chromosomal location of genes for heat tolerance as measured by membrane thermostability of common wheat cv.Hopc.Hereditas, 1996 (4) :1-3. (in Chinese)
            [21]陳希勇, 趙愛菊, 李亞軍, 劉玉萍。小麥耐熱性基因的染色體定位和遺傳效應分析。華北農學報, 2007, 22 (S2) :1-5.CHEN X Y, ZHAO A J, LI Y J, LIU Y P.Location of heat tolerance genes on chromosomes and analysis of gene effect of heat tolerance in wheat.Acta Agricuturae Boreali-Sinica, 2007, 22 (S2) :1-5. (in Chinese)
            [22]孫其信, 高立峰, 徐如強。異源細胞質對小麥耐熱性的遺傳影響。北京農業大學學報, 1994, 20 (4) :361-367.SUN Q X, GAO L F, XU R Q.The genetic effects of alien cytoplasm on wheat heat tolerance.Acta Agriculturae Universitatis Pekinensis, 1994, 20 (4) :361-367. (in Chinese)
            [23]PINTO R S, REYNOLDS M P, MATTHEWS K L, MCLNTYRE C L, OLIVARES J J, CHAPMAN S C.Heat and drought adaptive QTL in a wheat population designed to minimize confounding agronomic effects.Theoretical Applied Genetics, 2010, 121 (6) :1001-1021.
            [24]BENNETT D, REYNOLDS M, MULLAN D, IZANLOO A, KUCHEL H, LANGRIDGE P, SCHURBUSCH T.Detection of two major grain yield QTL in bread wheat (Triticum aestivum L.) under heat, drought and high yield potential environments.Theoretical and Applied Genetics, 2012, 125 (7) :1473-1485.
            [25]PALIWAL R, RODER M S, KUMAR U, SRIVASTAVA J P, JOSHI A K.QTL mapping of terminal heat tolerance in hexaploid wheat (T.aestivum L.) .Theoretical and Applied Genetics, 2012, 125 (3) :561-575.
            [26]VIJAYALAKSHMI K, FRUTZ A K, PAULSEN G M, BAI G H, PANDRAVADA S, GILL B S.Modeling and mapping QTL for senescence-related traits in winter wheat under high temperature.Molecular Breeding, 2010, 26:163-175.
            [27]YANG J, SEARS R G, GILL B S, PAULSEN G M.Quantitative and molecular characterization of heat tolerance in hexaploid wheat.Euphytica, 2002, 26 (2) :275-282.
            [28]TALUKADER S K, BABAR M A, VIJAYALAKSHMI K, POLAND J, PRASAD P V, BOWDEN R, FRITZ A.Mapping QTL for the traits associated with heat tolerance in wheat (Triticum aestivum L.) .BMC Genetics, 2014, 15:97.
            [29]MASON R E, MONDAL S, BEECHER F W, HAYS D B.Genetic loci linking improved heat tolerance in wheat (Triticum aestivum L.) to lower leaf and spike temperatures under controlled conditions.Euphytica, 2011, 180 (2) :181-194.
            [30]MASON R E, MONDAL S, BEECHER F W, PACHECO A, JAMPALA B, Ibrahim A M, Hays D B.QTL associated with heat susceptibility index in wheat (Triticum aestivum L.) under short-term reproductive stage heat stress.Euphytica, 2010, 174 (3) :423-436.
            [31]李世平, 昌小平, 王成社, 景蕊蓮。小麥幼苗耐熱性的QTL定位分析。西北植物學報, 2012, 32 (8) :1525-1533.LI S P, CHANG X P, WANG C S, JING R L.Mapping QTLs for seedling traits and heat tolerance indices in common wheat.Acta Botanica Boreali-Occidentlia Sinica, 2012, 32 (8) :1525-1533. (in Chinese)
            [32]李世平, 昌小平, 王成社, 景蕊蓮。小麥灌漿期耐熱性QTL定位分析。中國農業科學, 2013, 46 (10) :2119-2129.LI S P, CHANG X P, WANG C S, JING R L.Mapping QTL for heat tolerance at grain filling stage in common wheat.Scientia Agricultura Sinca, 2013, 46 (10) :2119-2129. (in Chinese)
            [33]王飛, 馬金玲, 秦丹丹, 田雪軍, 倪中福, 姚穎垠, 胡兆榮, 孫其信, 彭惠茹。小麥耐熱及熱敏感基因型在高溫脅迫下膜透性及膜脂組分的差異。農業生物技術學報, 2013, 21 (8) :904-910.WANG F, MA J L, QIN D D, TIAN X J, NI Z F, YAO Y Y, HU Z R, SUN Q X, PENG H R.The difference of permeability and membrane lipid composition in heat tolerant and susceptible wheat (Triticum aestivum) under high temperature stress.Journal of Agricultural Biotechnology, 2013, 21 (8) :904-910. (in Chinese)
            [34]李利紅, 梁書榮, 曲小菲, 趙會杰。外源鈣對高溫強光脅迫下小麥葉中蛋白激酶活性和D1蛋白磷酸化的影響。植物生理學報, 2010, 46 (5) :427-430.LI L H, LIANG S R, QU X F, ZHAO H J.Effects of Ca2+on the activiy of protein kinases and phosphorylation of D1 protein in wheat (Triticum asetivum L.) leaves under heat and high irradiance stress.Plant Physiology Journal, 2010, 46 (5) :427-430. (in Chinese)
            [35]HUBBARD K E, NISHIMURA N, HITOMI K, GETZOFF E D, SSHROEDER J I.Early abscisic acid signal transduction mechanisms:newly discovered components and newly emerging questions.Genes Development, 2010, 24 (16) :1695-1708.
            [36]CAMPBELL J L, KLUEVA N Y, ZHENG H G, NIETO-SOTELO J, HO T D, NGUYEN H T.Cloning of new members of heat shock protein HSP101 gene family in wheat (Triticum aestivum (L.) Moench) inducible by heat, dehydration, and ABA.Biochimica Biophysica Acta, 2001, 1517 (2) :270-277.
            [37]楊東清, 王振林, 倪英麗, 尹燕枰, 蔡鐵, 楊衛兵, 彭佃亮, 崔正勇, 江文文。高溫和外源ABA對不同持綠型小麥品種籽粒發育及內源激素含量的影響。中國農業科學, 2014, 47 (11) :2109-2125.YANG D Q, WANG Z L, NI Y L, YIN Y P, CAI T, YANG W B, PENG D L, CUI Z Y, JIANG W W.Effect of high temperature stress and spraying exogenous ABA post-anthesis on grain filling and grain yield in different types of stay-green wheat.Scientia Agricultura Sinca, 2014, 47 (11) :2109-2125. (in Chinese)
            [38]SEARS R G, COX T S, PAULSEN G M.Registration of KS89WGRC9 stress-tolerant hard red winter wheat germplasm.Crop Science, 1992, 32:507.
            [39]WAHID A, GELANI S, ASHRAF M, FOOLAD M.Heat tolerance in plants:an overview.Environmental and Experimental Botany, 2007, 61 (3) :199-223.
            [40]WANG L J, LI S H.Salicylic acid-induced heat or cold tolerance in relation to Ca2+homeostasis and antioxidant systems in young grape plants.Plant Science, 2006, 170 (4) :685-694.
            [41]SHI Q, BAO Z Y, ZHU Z J, YING Q S, QIAN Q Q.Effects of different treatments of salicylic acid on heat tolerance, chlorophyll fluorescence, and antioxidant enzyme activity in seedlings of Cucumis sativa LPlant Growth Regulation, 2006, 48 (2) :127-135.
            [42]王林華, 梁書榮, 呂淑敏, 趙會杰, 曲小菲, 趙雪娟。外源水楊酸與植物非生物脅迫抗性的關系及其作用機制。河南農業科學, 2010, 39 (8) :160-164.WANG L H, LIANG S R, L?S M, ZHAO H J, QU X F, ZHAO X J.The study of relationship and molecular mechanism exogenous ABA and abiotic stress.Journal of Henan Agricultural Science, 2010, 39 (8) :160-164. (in Chinese)
            [43]QIN D D, WU H Y, PENG H R, YAO Y Y, NI Z F, LI Z X, ZHOU C L, SUN Q X.Heat stress-responsive transcriptome analysis in heat susceptible and tolerant wheat (Triticum aestivum L.) by using Wheat Genome Array.BMC Genomics, 2008, 9:432.
            [44]SZUCS A, JAGER K, JURCA M E, FABIAN A, BOTTKA S, ZVARA A, BARNABAS B, FEHER A.Histological and microarray analysis of the direct effect of water shortage alone or combined with heat on early grain development in wheat (Triticum aestivum) .Physiology Plant, 2010, 140 (2) :174-188.
            [45]LIU Z S, XIN M M, QIN J X, PENG H R, NI Z F, YAO Y Y, SUN Q X.Temporal transcriptome profiling reveals expression partitioning of homeologous genes contributing to heat and drought acclimation in wheat (Triticum aestivum L.) .BMC Plant Biology, 2015, 15:152.
            [46]SKYLAS D J, CORDWEH S J, HAINS P G, BASSEAL D J, WALSH B J, BLUMENTHAL C, RATHMELL W, COPELAND L, WRIGLEY C W.Heat shock of wheat during grain filling:Proteins associated with heat tolerance.Journal of Cereal Science, 2002, 35 (2) :175-188.
            [47]MAJOUL T, BANCEL E, TRIBO E, HAMIDA J B, BRANLARD G.Proteomic analysis of the effect of heat stress on hexaploid wheat grain:Characterization of heat-responsive proteins from total endosperm.Proteomics, 2003, 3 (2) :175-183.
            [48]MAJOUL T, BANCEL E, TRIBO E, HAMIDA J B, BRANLARD G.Proteomic analysis of the effect of heat stress on hexaploid wheat grain:Characterization of heat-responsive proteins from nonprolamins fraction.Proteomics, 2004, 4 (2) :505-513.
            [49]KAMAL A H, KIM K H, SHIN K H, CHOI J S, BAIK B K, TSUJIMOTO H, HEO H Y, PARK C S, WOO S H.Abiotic stress responsive proteins of wheat grain determined using proteomics technique.Australian Journal of Crop Science, 2010, 4 (3) :196-208.
            [50]LAINO P, SHELTON D, FINNIE C, LEONARDIS A M, MASTRANGELO A M, SVENSSON B, LAFIANDRA D, MASCI S.Comparative proteome analysis of metabolic proteins from seeds of durum wheat (cv.Svevo) subjected to heat stress.Proteomics, 2010, 10 (12) :2359-2368.
            [51]WANG X, DINLERD B S, VIGNJEVICB M, JACOBSENC S, WOLLENWEBER B.Physiological and proteome studies of responses to heat stress during grain filling in contrasting wheat cultivars.Plant Science, 2015, 230:33-50.
            [52]GARDINER L J, TULLOCH M Q, OLOHAN L, PRICE H, HALL N, HALL A.A genome-wide survey of DNA methylation in hexaploid wheat.Genome Biology, 2015, 16:273.
            [53] 劉建, 小麥苗期耐熱性與DNA甲基化的關系研究[D].北京:中國農業大學, 2016.LIU J.The study of DNA methylation contributing to heat tolerance in wheat seedings[D].Beijing:China Agricultural University, 2016. (in Chinese)
            [54]XIN M M, WANG Y, YAO Y Y, XIE C J, PENG H R, NI Z F, SUN Q X.Diverse set of micro RNAs are responsive to powdery mildew infection and heat stress in wheat (Triticum aestivum L.) .BMC Plant Biology, 2010, 10:123.
            [55]XIN M M, WANG Y, YAO Y Y, SONG N, HU Z R, QIN D D, XIE C J, PENG H R, NI Z F, SUN Q X.Identification and characterization of wheat long non-protein coding RNAs responsive to powdery mildew infection and heat stress by using microarray analysis and SBS sequencing.BMC Plant Biology, 2011, 11:61.
            [56]WANG Y, SUN F L, CAO H, PENG H, NI Z, SUN Q, YAO Y.Tami R159 directed wheat Ta GAMYB cleavage and its involvement in anther development and heat response.PLo S ONE, 2012, 7 (11) :e48445.
            [57]HU Z R, SONG N, ZHENG M, LIU X, LIU Z S, XING J W, MA J, GUO W W, YAO Y Y, PENG H R, XIN M M, ZHOU D X, SUN Q X.Histone acetyltransferase GCN5 is essential for heat stress-responsive gene activation and thermotolerance in Arabidopsis.The Plant Journal, 2015, 84 (6) :1178-1191.

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